Valutazione della crescita degli sferoidi tumorali multicellulari (MCT)

Tumore multicellulare (MCT) gli sferoidi sono uno strumento essenziale nella ricerca sui tumori e negli screening farmacologici. Gli MCT possono essere definiti come aggregati di cellule eterogenee, strettamente impaccate con sferoidi altamente densi. Per utilizzare gli MCT nella ricerca fisiologica e nelle applicazioni cliniche, è importante caratterizzarne la natura, la cinetica di crescita e la risposta alla chemio e alle radiazioni.

Valutazione della circolarità degli MCT

La crescita di MCT è determinata dalla sua dimensione e forma, che viene valutata principalmente attraverso la microscopia ottica. Le immagini al microscopio ottico 2D vengono scattate periodicamente e analizzate tramite programmi software come immagine J, per determinare la circolarità degli sferoidi. La circolarità o “rotondità” degli sferoidi è a sua volta determinata dal metodo di coltura. Uno sferoide compatto aumenterà tipicamente la circolarità nell'arco di pochi giorni. Questo aumento è poi seguito da una diminuzione della circolarità nel restante periodo di coltura che indica la proliferazione cellulare (1-2).

Valutare la dimensione degli MCT

Le dimensione degli MCT viene determinato mediante misurazione di due diametri ortogonali da immagini al microscopio ottico. La dimensione può essere modulata in base al tempo di coltura, alla densità di semina cellulare e al tipo di linea cellulare. È necessario valutare accuratamente la dimensione dello sferoide per produrre dati affidabili che possano essere utilizzati per ulteriori studi. Una corretta comprensione delle dinamiche di crescita in parallelo con i diversi fattori che possono influenzare la crescita è uno strumento necessario per standardizzare le culture MCT utilizzate per sviluppare nuove opzioni di trattamento e migliorare le modalità di trattamento esistenti (1-3).

Riferimenti

1. Badea MA, Balas M, Hermenean A, Ciceu A, Herman H, Daniela I, et al. Influenza del matrigel su colture di sferoidi singoli e multipli nella ricerca sul cancro al seno. SLAS Scov. 2019;24(5):563–78.

2. Raghavan S, Mehta P, Horst EN, Ward MR, Rowley KR, Mehta G. Analisi comparativa delle tecniche di generazione di sferoidi tumorali per la tossicità differenziale dei farmaci in vitro. Oncobersaglio. 2016;7(13):16948–61.

3. Han, SJ, Kwon, S. & Kim, KS Sfide legate all'applicazione di sferoidi tumorali multicellulari in fase preclinica. Cancer Cell Int 21, 152 (2021).

4. Mcmillan, Kay & Mccluskey, Anthony & Sorensen, Annette & Boyd, Marie & Zagnoni, Michele. (2015). Tecnologie di emulsione per saggi di radiazione sferoidale tumorale multicellulare. L'analista. 141.