PETITES TECHNOLOGIES DE MISE À GRANDE ÉCHELLE POUR LES CULTURES CELLULAIRES

Avec l'évolution des outils de la biologie moléculaire et de la biotechnologie, de nombreux scientifiques ont découvert un moyen d'étendre les cultures cellulaires afin de produire des quantités suffisantes de cellules ou de milieu contenu pour des purifications ultérieures ou des fractions subcellulaires. Les dispositifs fréquemment utilisés pour augmenter les cellules adhérentes à l’échelle du laboratoire sont :

FLASQUES EN T : ce sont les consommables en plastique les plus couramment utilisés pour l’expansion cellulaire à un stade précoce, généralement lors de la culture de cellules cryoconservées. Les flacons T varient en taille, allant d'une zone de culture de 12 à 225 cm2. Ils sont généralement composés de polystyrène jetable traité au plasma ou de plastique pour culture tissulaire. Celles-ci sont économiques, bien que exigeantes en main-d'œuvre, lorsqu'il est nécessaire d'étendre les cellules au-delà des niveaux de laboratoire (1).

FLACONS MULTICOUCHES : Ce sont de grands flacons T composés de surfaces planes empilées. Le but est ici d'augmenter la surface disponible en incorporant un meuble multi-plateaux atteignant une surface totale dépendant du nombre de couches, généralement 2.5 m2. Elles peuvent être traitées comme une unité individuelle, les cellules de chaque couche devant être ensemencées, cultivées et détachées en même temps (1).

BOUTEILLES À ROULEAU : Ces bouteilles sont constituées de récipients cylindriques permettant de faire croître des cellules dans un système dynamique. Ils sont généralement placés dans un environnement chauffé sur une grille qui tourne lentement, autour de 5 à 240 tours/heure. Les cellules peuvent se fixer et recouvrir la surface interne du flacon roulant, ce qui amène les cellules à baigner en continu dans le milieu de culture tout en étant simultanément exposées aux gaz. De plus, la rotation fournit également un niveau de mélange qui empêche la formation de gradients dans le milieu qui pourraient affecter la croissance cellulaire. La surface disponible pour l'expansion est comprise entre 500 et 1700 2 cm2 (XNUMX).

FLACONS SPINNER : Il s'agit de flacons à fond plat couramment utilisés au laboratoire, pour les cultures en suspension, qui peuvent être utilisés pour valider la composition des milieux et les micro-supports. La culture est maintenue en suspension et l'agitation est réalisée par un barreau magnétique. Le milieu ainsi que les cellules sont inoculés avec un volume total de 100 à 200 ml à une vitesse d'agitation de 50 tours par minute. De plus, des micro-porteurs peuvent également être ajoutés aux flacons spinner, principalement pour effectuer des tests primaires avant de passer à des échelles plus grandes (2,3).

RÉFÉRENCES :

  1. Randers-Eichhorn L, Bartlett RA, Sipior J, Frey DD, Carter GM, Lakowicz JR et al. Capteurs basés sur la fluorescence : détection d'oxygène et autres applications biomédicales. Dans: Interaction laser-tissus VII. San José, Californie : Société internationale d'optique et de photonique, 147-158.
  2. Clapp KP, Castan A, Lindskog EK. Équipements de traitement en amont. dans Traitement biopharmaceutique. Amsterdam : Elsevier, 457-476. est ce que je: 10.1016/B978-0-08-100623-8.00024-4
  3. Tsai AC, Ma T. Expansion de cellules souches mésenchymateuses humaines dans un bioréacteur à microporteur. dans Bioréacteurs en biologie des cellules souches. New York, New York : Springer, 77-86. est ce que je: 10.1007/7651_2016_338