Culture cellulaire hépatocytaire primaire applicable aux études sur les lésions hépatiques d'origine médicamenteuse

Les lésions hépatiques d'origine médicamenteuse (DILI) sont une réponse indésirable à des médicaments ou à d'autres produits chimiques xénobiotiques. Cela peut se produire comme un événement prédictif lorsqu’une personne est exposée à des quantités toxiques de certains composés ou comme un événement imprévisible provoqué par une combinaison de médicaments d’usage courant. DILI est également la principale source d’échecs d’essais cliniques, d’avertissements de précaution et de retraits de médicaments après commercialisation (Procter et al, 2017). Par conséquent, des outils prédictifs fiables doivent être développés pour évaluer le risque d’hépatotoxicité dans les processus de découverte de médicaments. À cet effet, les cultures sphéroïdes 3D se sont révélées être un outil prometteur pour évaluer la possibilité d’hépatotoxicité.

Cultures de cellules sphéroïdes 3D sur plaques de fixation basses

Les cultures sphéroïdes 3D d'hépatocytes primaires sont capables d'imiter efficacement l'état cellulaire in vivo et de démontrer un phénotype hépatique et une activité métabolique améliorés avec l'avantage supplémentaire d'être une culture cellulaire stable et viable (Procter et al, 2017). Il existe un large éventail de méthodes disponibles pour former des sphéroïdes cellulaires. Parmi celles-ci, les surfaces de fixation faibles se sont révélées être les plus efficaces pour les cultures de cellules primaires d’hépatocytes. Ces surfaces sont chimiquement définies, faciles à manipuler et reproductibles, ce qui en fait un excellent choix pour les tests d'hépatocytotoxicité.

Sphéroïdes hépatocytaires utilisant le revêtement FaCellitate BIOFLOAT™ U-bottom plaques

A cet effet, le revêtement FaCellitate BIOFLOAT™' U-bottom Les plaques, par rapport à d'autres plaques à fixation ultra basse (ULA) de référence, démontrent une génération rapide de sphéroïdes avec une structure et une cohérence bien définies. Les hépatocytes primaires cultivés sur des plaques recouvertes de FaCellitate BIOFLOAT™ ont formé des agrégats dans les 24 heures suivant l'ensemencement par rapport aux autres plaques ULA. Des sphéroïdes compacts se sont formés au troisième jour. De plus, les sphéroïdes hépatocytaires ont démontré une activité enzymatique basale robuste de type in vivo, indépendante de la surface de culture, ce qui indique sa compatibilité fonctionnelle. De plus, les plaques revêtues de BIOFLOAT™ peuvent également être utilisées pour former des sphéroïdes d'hépatocytes primaires humains, qui étaient auparavant difficiles à cultiver sur d'autres références. Plaques ULA.

L'excellente nature répulsive des cellules des plaques revêtues de BIOFLOAT™ favorise la formation de sphéroïdes ronds et rapides avec une morphologie et une fonction cohérentes. Les plaques revêtues sont résistantes aux rayures, permettant une manipulation facile. Collectivement, les sphéroïdes hépatiques primaires cultivés sur des revêtements BIOFLOAT™ U-bottom plaques, s’avère être une excellente plate-forme modifiable pour évaluer l’hépatotoxicité dans les criblages de réponse aux médicaments à haut débit.

Bibliographie

1. https://facellitate.com/wp-content/uploads/Application-Note-Primary-Cells.pdf

2. Proctor, WR, Foster, AJ, Vogt, J. et al. Utilité des microtissus hépatiques humains sphériques pour la prédiction des lésions hépatiques cliniques induites par des médicaments. Arch Toxicol 91, 2849-2863 (2017). https://doi.org/10.1007/s00204-017-2002-1

3. Suk, Ki Tae et Kim, Dong Joon. (2012). Lésions hépatiques d'origine médicamenteuse : présentes et futures. Hépatologie clinique et moléculaire. 18. 249-57. 10.3350/cmh.2012.18.3.249.