CRÉEZ VOTRE PROPRE LABORATOIRE DE CULTURE CELLULAIRE

La culture continue de cellules eucaryotes est devenue une technique majeure dans plusieurs domaines : biologiques, recherche biochimique et biomédicale. La culture cellulaire nécessite un engagement d’énergie et de ressources pour être entreprise de manière professionnelle. Il existe un besoin continu d'installations de culture, plusieurs considérations fondamentales telles que l'ENVIRONNEMENT, l'EMPLACEMENT, la VENTILATION, les GAZ, les ÉQUIPEMENTS DE BASE pour n'en nommer que quelques-uns.

De petites installations de culture cellulaire peuvent être conçues sans apporter de modifications majeures aux salles de laboratoire. Deux considérations fondamentales majeures régissent le futur laboratoire de culture cellulaire : LA CONTAMINATION ET LA SÉCURITÉ. Les fondements de culture de cellules doivent beaucoup aux méthodes de base développées par les microbiologistes au cours du siècle dernier. Les cellules eucaryotes sont très sensibles aux produits métaboliques primaires et secondaires des microbes.

Les bactéries et les champignons constituent donc le plus gros problème. Les cellules eucaryotes peuvent également potentiellement héberger des microbes subcellulaires susceptibles de provoquer des maladies. Il convient également de noter que l’emplacement correct d’une installation de culture cellulaire est tout aussi important. L'environnement de travail doit être propre, exempt de poussière et facile à désinfecter. En outre, il faut également réfléchir à la taille et au poids des équipements, comme le flux d'air laminaire. (1,2)

ESPACE DE TRAVAIL DE CULTURE CELLULAIRE : EXIGENCES DE BASE ET DISPOSITION

Merci beaucoup cultures cellulaires peut être maintenu dans un milieu tamponné ; cependant, certaines cellules ne se développent pas de manière optimale dans un milieu tamponné mais ont besoin du tampon fourni par l'équilibre de 5 % de CO2 avec du bicarbonate dans le milieu. Cela peut être important pour certaines lignées cellulaires spécifiques et cultures primaires. La ventilation et la circulation de l'air dans l'environnement de culture cellulaire sont essentielles aux opérations.

Au plus simple, il doit y avoir un flux d'air continu dans la hotte laminaire, évitant ainsi la circulation de la poussière et de la saleté. Idéalement, il ne devrait y avoir aucune fenêtre ouverte. Des filtres à particules d'air à haute efficacité (HEPA) à l'intérieur des armoires garantiraient un environnement de travail de bonne qualité et stérile. (1) Les filtres HEPA ont une efficacité de 99.9 à 99.97 %, ils contribuent également à améliorer les opérations et la qualité de l'air sous l'armoire.

Pour effectuer une gamme de base de procédures de culture cellulaire, une liste d'équipements doit être prise en compte : tels qu'une armoire à flux d'air laminaire, un incubateur, une centrifugeuse, un microscope, un jeu de pipettes, une micropipette, un hémocytomètre et un congélateur. (2) Outre la mise en place de l'espace de travail avec tous les instruments, une formation régulière, des procédures opérationnelles standard et une gestion centralisée de tous les aspects de la culture cellulaire garantiraient une surveillance économique, continue et de haut niveau d'opérations. (3)

L'idée finale serait de mettre en place un environnement de travail stérile adapté à la croissance des cultures cellulaires, car elles jouent un rôle essentiel dans les études de recherche.

RÉFÉRENCES:

1. CDC (1995). « Armoires de biosécurité ; Confinement primaire pour les risques biologiques : sélection, installation et utilisation d'enceintes de sécurité biologique », 1ère éd. Département américain de la Santé et des Services sociaux, Centres de services de santé publique pour le contrôle et la prévention des maladies et Instituts nationaux de la santé. Imprimerie du gouvernement américain, Washington. Édition Web http://www.niehs. nih.gov/odhsb/biosafe/bsc/bsc.htm

2. Freshney, RI (2000). «Culture de cellules animales : un manuel de technique de base», 4e éd. Wiley-Liss, New York.

3. Doyle, A. (1998). « Culture cellulaire et tissulaire : procédures de laboratoire » (A. Doyle, JB Griffiths et DG Newell, éd.), Chap. 1. Wiley, Chichester.