Cultivo primario de células de hepatocitos aplicable para estudios de lesión hepática inducida por fármacos.

La lesión hepática inducida por fármacos (DILI) es una respuesta adversa a fármacos u otras sustancias químicas xenobióticas. Puede ocurrir como un evento predictivo cuando una persona está expuesta a cantidades tóxicas de algunos compuestos o como un evento impredecible causado por una combinación de drogas de uso común. DILI es también la principal fuente de fracasos de ensayos clínicos, advertencias de precaución y retiros de medicamentos posteriores a la comercialización (Procter et al, 2017). Por lo tanto, es necesario desarrollar herramientas predictivas fiables para evaluar el riesgo de hepatotoxicidad en los procesos de descubrimiento de fármacos. En este sentido, los cultivos de esferoides 3D han demostrado ser una herramienta prometedora para evaluar la posibilidad de hepatotoxicidad.

Cultivos de células esferoides 3D en placas de fijación baja

Los cultivos de esferoides 3D de hepatocitos primarios pueden imitar eficazmente el estado celular similar in vivo y demostrar un fenotipo hepático y una actividad metabólica mejorados con la ventaja adicional de ser un cultivo celular estable y viable (Procter et al, 2017). Existe una amplia gama de métodos disponibles para formar esferoides celulares. Entre las cuales, las superficies de baja unión han demostrado ser más efectivas para los cultivos de células primarias de hepatocitos. Estas superficies están definidas químicamente, son fáciles de manipular y reproducibles, lo que las convierte en una excelente opción para las pruebas de hepatocitotoxicidad.

Esferoides de hepatocitos recubiertos con FaCellitate BIOFLOAT™ U-bottom platos

Para este efecto, FaCellitate BIOFLOAT™' recubierto U-bottom Las placas, en comparación con otras placas de fijación ultrabaja (ULA) de referencia, demuestran una rápida generación de esferoides con una estructura y consistencia bien definidas. Los hepatocitos primarios cultivados en placas recubiertas con FaCellitate BIOFLOAT™ formaron agregados dentro de las 24 horas posteriores a la siembra en comparación con las otras placas ULA. Se formaron esferoides compactos el día 3. Además, los esferoides de hepatocitos demostraron una actividad enzimática basal robusta similar a la in vivo, independiente de la superficie de cultivo, lo que indica su compatibilidad funcional. Además, las placas recubiertas con BIOFLOAT™ también se pueden utilizar para formar esferoides de hepatocitos primarios humanos, que antes eran difíciles de cultivar en otros puntos de referencia. Placas ULA.

La excelente naturaleza repelente de células de las placas recubiertas de BIOFLOAT™ promueve la formación de esferoides redondos y rápidos con morfología y función consistentes. Las placas revestidas son resistentes a los arañazos, lo que permite un fácil manejo. En conjunto, esferoides hepáticos primarios cultivados en sistemas recubiertos con BIOFLOAT™. U-bottom placas, demuestra ser una excelente plataforma modificable para evaluar la hepatotoxicidad en pantallas de respuesta a fármacos de alto rendimiento.

Referencias

1. https://facellitate.com/wp-content/uploads/Application-Note-Primary-Cells.pdf

2. Proctor, WR, Foster, AJ, Vogt, J. et al. Utilidad de microtejidos hepáticos humanos esféricos para la predicción de lesión hepática clínica inducida por fármacos. Arch Toxicol 91, 2849–2863 (2017). https://doi.org/10.1007/s00204-017-2002-1

3. Suk, Ki Tae y Kim, Dong Joon. (2012). Lesión hepática inducida por fármacos: presente y futuro. Hepatología clínica y molecular. 18. 249-57. 10.3350/cmh.2012.18.3.249.