Optimizando sus experimentos con placas BioFloat
Las placas recubiertas con Biofloat son fáciles de usar, versátiles y fiables. No existe un protocolo específico para el uso de las placas; sin embargo, para obtener la máxima confiabilidad y reproducibilidad de los experimentos, siga las siguientes pautas.
1. Densidad de siembra: la densidad de siembra depende de la línea celular y del tamaño de esferoide deseado. Para la mayoría de las líneas celulares, se recomienda sembrar entre 1,000 y 12,000 células por pocillo.
2. No centrifugar a menos que se especifique lo contrario. Las placas Biofloat con fondo en forma de U generalmente no requieren un paso de centrifugación para lograr la formación de esferoides. La autoagregación generalmente ocurre por sí sola dentro de las 24 a 48 horas posteriores a la siembra.
3. Centrifugación: si el protocolo especifica un paso de centrifugación, sugerimos mantener la centrifugación al máximo. 200 xg durante 3 minutos. Una centrifugación excesiva conlleva el riesgo de alterar la clasificación del polímero, que es esencial para la formación uniforme de esferoides.
4. Soluciones que se deben evitar: el recubrimiento de polímero de las placas BioFloat es estable en la mayoría de los medios y soluciones de cultivo celular, con la excepción de la solución DMSO con una concentración superior al 5 % y las soluciones de etanol o metanol con una concentración superior al 10 %. Las soluciones de alcohol en estas concentraciones particulares alteran el recubrimiento de polímero e impiden su función completa.
5. Soluciones de obtención de imágenes: si nota patrones en la superficie de la placa que interfieren con la obtención de imágenes, lo más probable es que se trate de polímero sobrante. Para superar esta limitación, recomendamos agregar un paso de lavado adicional a su proceso. Simplemente agregue PBS a sus pocillos, centrifugue a 200 xg durante 3 minutos y aspire el líquido. Luego, su placa podrá volver a usarse directamente para obtener imágenes y análisis. El polímero no es dañino y no influye sobre el crecimiento celular.
Protocolo general de uso de soluciones Biofloat flex
BIOFLOAT Flex es una solución de recubrimiento polimérico que se adhiere rápidamente a cualquier superficie de plástico o vidrio, generando superficies con propiedades repelentes de proteínas y células. Las altas propiedades antiadhesivas de la solución hacen que las superficies del cultivo celular se vuelvan "invisibles" para la célula, favoreciendo la autoagregación y el crecimiento de las interacciones célula-célula, que es vital para la estructura y función celular in vivo. Para obtener más información sobre los materiales que se pueden utilizar para el recubrimiento, consulte nuestra Nota de aplicación BIOFLOAT Flex en la página Science Room del sitio web.
Para obtener instrucciones detalladas sobre cómo recubrir sus placas, siga la hoja de protocolo incluida en el producto. Brevemente, la solución de polímero se agrega a la placa de cultivo celular elegida y se aspira después de 3 minutos. Luego se deja secar la placa al aire a temperatura ambiente bajo una campana de flujo laminar, durante 30 minutos. Las placas recubiertas pueden usarse inmediatamente o almacenarse a temperatura ambiente para su uso posterior.
Importante tener en cuenta: la solución BIOFLOAT no es compatible con superficies de cultivo celular pretratadas. Evite el uso de la solución de polímero en combinación con cualquier superficie o placa, placa de Petri u otro material de laboratorio que esté “tratado con cultivo celular” o “tratado con TC” o que esté tratado de otro modo. El pretratamiento impedirá la unión eficaz y robusta de la solución de polímero BIOFLOAT FLEX y, en consecuencia, interrumpirá la formación de esferoides uniformes.
