Caracterización de esferoides tumorales multicelulares.
Los esferoides de tumores multicelulares (MCT) son una herramienta esencial en la investigación relacionada con tumores y en la detección de fármacos. Los MCT se pueden definir como agregados de células heterogéneas, estrechamente empaquetadas con esferoides muy densos. Estas células exhiben fuertes interacciones célula-célula y célula-matriz extracelular (MEC) representativas de la fisiología tumoral in vivo (1-2). Sin embargo, es importante monitorear el desarrollo de MCT para garantizar la generación de cultivos confiables y reproducibles que puedan usarse para estudios adicionales y detección de alto rendimiento.
Seguimiento estructural y morfológico.
Normalmente, el desarrollo de los MCT se controla mediante microscopía óptica. Las imágenes periódicas de MCT permiten el estudio de la cinética de crecimiento del volumen de los esferoides. Además, también proporciona información morfológica sobre el MCT para determinar su viabilidad y confiabilidad (3).
Métodos de obtención de imágenes por microscopía electrónica El microscopio electrónico de barrido (SEM) se utiliza ampliamente como un método más confiable para obtener imágenes precisas de MCT, en comparación con la microscopía óptica tradicional. Actualmente se utiliza para determinar la superficie del material con resolución micrométrica y nanométrica. Para esta forma particular de obtención de imágenes, los MCT se fijan, se deshidratan y luego se recubren con materiales conductores como el oro-paladio, para obtener información morfológica precisa de los MCT (3).
El microscopio electrónico de transmisión (TEM) es otro método comúnmente utilizado para caracterizar la estructura interna de los MCT. Para ello, los MCT se fijan, se deshidratan y luego se cortan en rodajas finas antes de recubrirlos con material conductor. La información de las imágenes TEM ha sido vital, especialmente para determinar el proceso de administración de fármacos de los MCT, y ha ayudado a visualizar los mecanismos de administración de fármacos de terapias contra el cáncer como la doxorrubicina, los puntos cuánticos y las micelas y su internalización en las células (3-6). Estos detalles a nanoescala obtenidos utilizando estos métodos de microscopía son importantes en el proceso de estandarización para determinar la viabilidad, confiabilidad y reproducibilidad de los MCT en la investigación fisiopatológica de tumores, así como en las pruebas de respuesta a fármacos.
Referencias
1. Pampaloni F, Reynaud EG, Stelzer EH. La tercera dimensión cierra la brecha entre el cultivo celular y el tejido vivo. Nat Rev Mol Cell Biol. 2007;8:839–45. 2.
2. Maddaly R, Paramesh V, Kaviya SR, Anuradha E, Paul Solomon FD. Sistemas de cultivo celular 3D: ventajas y aplicaciones. Fisiol de células J. 2015;230:16–26.
3. Dubois C, Dufour R, Daumar P, Aubel C, Szczepaniak C, Christelle B, et al. Desarrollo y respuesta citotóxica de dos modelos de cultivo celular tridimensionales proliferativos MDAMB-231 y no proliferativos SUM1315 de líneas celulares de cáncer de mama de tipo basal triple negativo. Oncoobjetivo. 2017;8(56):95316–31.
4. Yuuki S, Norihiko S, Masaki M, Fumio H, Yoko M, Tomio A, et al. Diferencias morfológicas y funcionales mejoradas del cáncer de páncreas con características epiteliales o mesenquimales en cultivo 3D. Representante de ciencia ficción 2019;9:10871.
5. Hongxu L, Martina HS. Esferoides tumorales multicelulares (MCTS) como herramienta de evaluación 3D in vitro de nanopartículas. Pequeño. 2018;14:1702858.
6. Hui-li M, Qiao J, Siyuan H, Yan W, Jin Cui T, Dongliang W, et al. Esferoides tumorales multicelulares como modelo de tumor similar a in vivo para obtener imágenes tridimensionales de la penetración celular de nanomateriales y quimioterapia. Imágenes Mol. 2012;11(6):487–98.
7. Hagendorfer, Harald. (2011). Nuevos métodos analíticos para análisis fraccionados por tamaño, cuantitativos y de elementos específicos de nanopartículas de ingeniería metálica en aerosoles y dispersiones. 10.
