So finden Sie heraus, welches Zellkulturmedium das richtige für Sie ist
Wachstumsmedien bleiben eine Schlüsselkomponente von 3D-Zellkulturexperimenten, um sicherzustellen, dass Zellen außerhalb ihrer natürlichen Umgebung gedeihen können. Die kontinuierliche Weiterentwicklung und Optimierung von Zellkulturmedien liefern neue Erkenntnisse über den sie unterstützenden Zusammenhang zwischen Zellen und Zellkulturmedien und damit auch über die Ergebnisse der Experimente. Heutzutage stehen je nach Bedarf und Zweck des Experiments viele Optionen für Wachstumsmedien zur Verfügung.
Man kann mit Sicherheit sagen, dass wir seit der Pionierarbeit von Forschern wie Ross Harrison und Harry Eagle einen langen Weg zurückgelegt haben. Wissenschaftler müssen den Zelltyp und das Gesamtziel des Experiments berücksichtigen, bevor sie die Kulturmedien auswählen, da diese sich direkt auf die Ergebnisse auswirken können (1,2).
Worauf Sie bei einem Zellkulturmedium achten sollten
Bei so vielen im Handel erhältlichen Zellkultur-Wachstumsmedien kann es einschüchternd sein, das optimale Medium für Ihre Experimente zu finden. Im Folgenden sind einige Faktoren aufgeführt, die Sie berücksichtigen sollten:
1. Zelllinien
Die Wahl eines Wachstumsmediums hat erheblichen Einfluss auf den Erfolg von Zellkulturexperimenten (3). Die Wahl der Zellkulturmedien hängt von der Art der zu kultivierenden Zelllinien, dem Zweck der Kultur und den im Labor verfügbaren Ressourcen ab. Die in der Biotechnologieindustrie am häufigsten verwendeten Zelllinien sind CHO-Zellen, BHK-21-Zellen, Hybridomzellen, Myelomzellen und normale diploide Fibroblasten (4). Im Allgemeinen ist es immer gut, mit MEM für adhärente Zellen und RPMI-1640 für Suspensionszellen zu beginnen.
2. Art der zu verwendenden Medien: natürliche oder synthetische Medien
Jedes Wachstumsmedium, ob natürlich oder synthetisch, hat seine eigenen Vor- und Nachteile, die den Forschern bei der Wahl des Mediums als Leitfaden dienen. Natürliche Medien enthalten eine breite Palette an Nährstoffen wie Aminosäuren, Vitamine und Mineralien und liefern Komponenten für die Zelladhärenz. Allerdings haben sie neben einem höheren Kontaminationsrisiko auch den Nachteil, dass ihre Zusammensetzung nicht einheitlich ist. . Synthetische Medien haben den entscheidenden Vorteil der Konsistenz und sind vergleichsweise kostengünstiger (5).
3. Andere Faktoren
Abgesehen von der Art der Medien und Zelllinien, die für das Experiment verwendet werden sollen, müssen Sie die Möglichkeiten und Einschränkungen Ihres Labors berücksichtigen, um die am besten geeigneten Medien für Ihre Experimente zu finden. Stammzellen benötigen beispielsweise Medien, die die Erhaltung, Differenzierung und nachgelagerte Anwendungen erleichtern können. Stellen Sie sicher, dass Sie Ihre Zellen, Ziele und Laborspezifikationen verstehen, damit Sie das am besten geeignete Wachstumsmedium auswählen können.
References:
1. Cantor JR. Der Aufstieg physiologischer Medien. Trends Zellbiol. 2019:29-11. doi: 854/j.tcb.861. Epub 10.1016, 2019.08.009. Oktober. PMID: 2019; PMCID: PMC14.
2. MORGAN JF, MORTON HJ, PARKER RC. Ernährung tierischer Zellen in Gewebekulturen; erste Studien auf einem synthetischen Medium. Proc Soc Exp Biol Med. 1950 Jan;73(1):1-8. doi: 10.3181/00379727-73-17557. PMID: 15402504.
3. Weller TH, Wheeldon SK. Die In-vitro-Kultivierung von Zellen, die aus erwachsenen Schistosoma mansoni stammen. I. Methodik; Kriterien zur Bewertung von Kulturen; und Entwicklung von Medien. Bin J Trop Med Hyg. 1982 März;31(2):335-48. doi: 10.4269/ajtmh.1982.31.335. PMID: 7072898.
4. Clifford WJ, Anellis A, Ross EW Jr. Bewertung von Medien, Inkubationszeit und -temperatur sowie Methode zur Zählung mehrerer Stämme von Clostridium perfringens-Sporen. Appl. Mikrobiol. 1974 Apr;27(4):784-92. doi: 10.1128/am.27.4.784-792.1974. PMID: 4363558; PMCID: PMC380135.
5. Mariani E, Mariani AR, Monaco MC, Lalli E, Vitale M, Facchini A. Kommerzielle serumfreie Medien: Hybridomwachstum und Produktion monoklonaler Antikörper. J Immunol-Methoden. 1991. Dezember 15;145(1-2):175-83. doi: 10.1016/0022-1759(91)90324-9. PMID: 1765649.
